人類(lèi)乳頭瘤病毒(HPV)核酸檢測(cè)試劑盒PCR通常采用PCR技術(shù)，通過(guò)擴(kuò)增樣本中的HPV DNA片段來(lái)進(jìn)行檢測(cè)。具體步驟包括：提取樣本中的DNA，使用特異性引物和Taq聚合酶擴(kuò)增目標(biāo)DNA片段，將擴(kuò)增產(chǎn)物與探針結(jié)合并檢測(cè)熒光信號(hào)。陽(yáng)性樣本在PCR擴(kuò)增后會(huì)產(chǎn)生特定的熒光信號(hào)，而陰性樣本則不會(huì)。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果判斷樣本中是否存在HPV感染。

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本產(chǎn)品是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品，含有Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR所需要的成分，用戶(hù)只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR反應(yīng)，具有廣泛的用途。

人類(lèi)乳頭瘤病毒(HPV)核酸檢測(cè)試劑盒PCR特點(diǎn)：

1. 方便，用戶(hù)只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)。

2. 快捷，操作步驟已經(jīng)限度地簡(jiǎn)化，能減少污染，降低實(shí)驗(yàn)誤差。

3. 本產(chǎn)品A型含電泳染料，PCR反應(yīng)液可直接上樣電泳，進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。

4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，反應(yīng)的靈敏度高，特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見(jiàn)的DNA樣品。

5. 產(chǎn)物可直接用于T載體克隆，不需要額外的加A反應(yīng)。

使用及效果：將本產(chǎn)品15μL與用戶(hù)自備的模板，引物和水共15μL混合后，直接進(jìn)行PCR反應(yīng)(PCR參數(shù)由用戶(hù)自己確定)，反應(yīng)結(jié)束后直接取10μL電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。

以下是豬藍(lán)耳病毒PCR核酸檢測(cè)試劑盒的產(chǎn)品介紹：

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊(96孔)。

2、標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200U/L，然后做系列倍比稀釋(注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)，分別配制成200 U/L，100U/L，50U/L，25U/L，12.5U/L，6.25U/L，3.12U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔0U/L。如配制100U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml (不要少于0.3ml )200U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。

使用及效果：

PCR反應(yīng)特點(diǎn)：

(1) 特異性強(qiáng)

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對(duì)原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡(jiǎn)便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。

(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。